蛋白质印迹法（免疫印迹试验）即Western blot，是分子生物学，生物化学等学科中的一种十分常用的实验方法。这种方法于1979年首次提出，是将电泳分离后的细胞或组织中的蛋白质从凝胶转移到固相载体如NC膜上，然后利用特异性抗体检测特定抗原，分析蛋白质在细胞或者组织中的表达情况的一种蛋白质检测技术。现已广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究、抗体活性检测和疾病早期诊断等多个方面。
在显影过程中，较为简单也是目前科研中最为常用的方法是ECL化学发光法，发表文章时大都也选择这种方法。ECL（electrochemiluminescence）是一种化学发光试剂，一般是Western blot实验中的最后一步，需要1：1混合溶液A和溶液B（一般使用的发光液A和B分别为鲁米诺和过氧化氢），混合液均匀覆盖PVDF膜，成像仪曝光后可显色观察实验结果。
鲁米诺是一种重要的化学发光试剂，它的氧化反应需要在碱性缓冲液中进行，在过氧化氢存在下形成激发态中间体，当回到基态时发光，波长为425nm。早期是使用鲁米诺直接标记抗原/抗体，但近年来已改用过氧化物酶标记抗体，以鲁米诺作为发光底物，Kodak Am erliteTM半自动分析系统就是利用这一体系专门设计的。
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ECL化学发光法检测辣根过氧化酶（HRP）的原理如下：辣根过氧化物酶在过氧化氢存在的条件下，氧化化学发光底物鲁米诺并产生激发光，在化学增强剂的作用下，光信号可被放大数千倍，随后采用X胶片或成像仪检测即可。ECL方法的特点为操作简便、灵敏度高、线性范围广等。
博奥龙增强型ECL化学发光试剂盒也是基于这种原理，检测灵敏度可达到pg级，同时在此基础上优化了第五组成，使用了新型高效增强剂，发光强度比传统ECL显色液提高了30-100倍，并且有效地降低了背景。试剂盒使用新型氧化剂以代替双氧水，提高了试剂盒的稳定性，室温可稳定防止一年。目前有4ml规格的试用装，推荐大家试用。返回搜狐，查看更多